<wbr id="gcq8x"><legend id="gcq8x"></legend></wbr>
    <nav id="gcq8x"><optgroup id="gcq8x"></optgroup></nav>
    <form id="gcq8x"><source id="gcq8x"><noscript id="gcq8x"></noscript></source></form>
  1. 致电我们

    400 118 0390

    QuanNUA 核酸分型质谱的 10 种鸭源性致病病毒的快速检测,方法特异性良好

    QuanNUA 核酸分型质谱的 10 种鸭源性致病病毒的快速检测,方法特异性良好

    仪器与试剂

    目标鸭源性病原体包括 DHAV-1 分离株 C80(DQ864514)、DHAV-3 分离株 C-GY(EU352805)、DAstV-1 分离株 D17(MN149392)、DAstV-2 分离株 SL4 (KF753806)、DRV-1 分离株 815-12(KC508656)、DRV-2 分离株 091(JX478256)、 TMUV 分离物 PS(KT876991)、GPV 分离物 JS1(KT935531)和 DEV 来自中国 农业大学兽医学院。AIV 亚型 H9N2(GQ373128)由中国农业大学禽流感实验室 提供。所有这些病毒在检测前均经 RT-PCR/PCR 鉴定。非靶标鸭源性病原菌包括 大肠杆菌、沙门氏菌和鸭疫里默氏菌,均来自中国农业大学兽医学院。2.5×PCR mix、质量探针试剂盒,以及 QuanTOF 质谱仪及 QuanNUA 软件,均来自于融智 生物科技(青岛)有限公司

    实验方法

    分别下载 10 种病毒的基因组序列,针对选定的靶基因,设计质粒构建用引物和检测用引物,分别构建了标准 质粒,建立检测方法,并确定检测方法的特异性;对标准质粒进行 10 倍系列稀释,确定该方法的敏感性。利用该 检测方法对人工制备的混合感染样品进行检测,与普通 PCR 检测结果进行比对。 结果与讨论 结果显示,本研究所建立的检测方法可同时检测到包括鸭甲肝病毒 1 型、鸭甲肝病毒 3 型、鸭星状病毒 1 型、 鸭星状病毒 2 型、鸭呼肠孤病毒 1 型、鸭呼肠孤病毒 2 型、坦布苏病毒、禽流感病毒、小鹅瘟病毒和鸭病毒性肠 炎病毒等 10 种病毒和 1 种内参基因,且 10 种病毒之间的检测结果互不干扰;对 10 倍系列稀释的标准质粒进行检测, 当稀释度为 10-10 时仍能检测到核酸,针对不同病毒的标准质粒最低检出量为 1.3~7.8 × 100 copies,对混合样 品的检测结果与普通 PCR 结果一致。